對(duì)液相色譜柱平衡的探討
點(diǎn)擊次數(shù):1517 更新時(shí)間:2021-04-19
液相色譜柱包括反相色譜柱、陰離子交換樹脂色譜柱、陽離子交換樹脂色譜柱和離子分離色譜柱。用于反相分離的還有兩種二氧化硅基C8和C18色譜柱。液相色譜柱通常由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。
液相色譜柱在使用前需進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
液相色譜柱的平衡說明:
反相柱由工廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請(qǐng)確保分析樣品所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動(dòng)相來平衡色譜柱,您就會(huì)在處理問題方面獲得大的“補(bǔ)償”,而且色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng),具體操作步驟如下:
1.平衡開始時(shí)將流速緩慢地提高,用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對(duì)試劑流速如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來平衡)。
2.如果使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水“過渡”即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動(dòng)相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。